热门搜索:基质胶,血清,耗材
产品分类

Product category

技术文章 / article 您的位置:网站首页 > 技术文章 > matrigel基质胶的使用方法

matrigel基质胶的使用方法

发布时间: 2022-05-13  点击次数: 259次
   matrigel基质胶从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达研究。
  
  产品特性:
  Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长,也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,可以用于细胞贴壁,但不能用于细胞的分化研究。
  
  matrigel基质胶的使用方法:
  特别注意:基质胶在22-35℃能够快速成胶。为了保证Matrixgel基质的成胶性能与稳定性,最终稀释浓度不应低于3mg/ml(液的浓度因批次不同有差异)。可用无血清培养基来稀释Matrixgel,稀释后需要立即使用。
  A.薄胶制备方法
  1)融化后,用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。
  2)将需要使用的培养板置于冰上,按50μL/cm2生长面积的浓度加入Matrixgel基质。
  3)在37℃放置30分钟,此时平板即可使用。
  
  B.厚胶制备方法
  1)融化后,用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。
  2)将需要使用的培养板置于冰上,将培养的细胞与Matrixgel基质混合,用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150-200μL/c的浓度加入Matrixgel基质。
  3)在37℃放置30分钟,此时即可加入细胞培养液。细胞也可生长在此厚胶的上层。
  
  C.薄层包被方法
  1)融化后,用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。
  2)采用无血清培养基稀释Matrixgel基质到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验,从而确定最佳的包被浓度。
  3)将稀释的Matrixgel基质加入需要包被的培养器皿中,包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育1小时。
  4)去除未凝固结合的Matrixgel基质,用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。

联系我们

上海诺娃医药科技有限公司 公司地址:中国(上海)自由贸易试验区奥纳路55号1幢607室   技术支持:化工仪器网
  • 邮箱:2452622533@qq.com

扫一扫 更多精彩

微信二维码

网站二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部