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一起去看看基质胶成瘤实验材料和步骤

发布时间: 2022-04-21  点击次数: 438次
   基质胶成瘤与基底膜间的相互作用是调控细胞素胶可认为是一种可溶性的基底膜基质。主要成分包括:层黏连蛋白、胶原IV等,同时含TGF-β成纤维细胞生长因子、组织纤维酶原活化因子以及其它在EHS肿瘤中自然表达的生长因子等。基质胶用于制备各种要求的基底膜基质,用于细胞信号研究,诸如:鼠肾干细胞形成肾小管过程中生长因子作用研究,鼠乳腺上皮干细胞的基因表达研究,transwell的肿瘤侵袭力实验等。
  
  下面我们一起去看看基质胶成瘤实验需要准备的材料和实验步骤:
  一、实验材料
  细胞:B16-F10
  培养基:含10%FBS的完全培养基
  耗材:预冷枪头、预冷离心管
  其他:胰酶,PBS,Matrigengel(ABW货号:批次a和批次b两个批次)
  
  二、实验步骤
  A.准备基质胶
  1.4℃解冻Matrigengel,实验前转移到冰盒中。(注意:同样要准备一些4℃预冷的枪头用于吸取Matrigengel)
  B.制作细胞悬液
  取对数生长期的细胞,经消化、离心、计数后,用无血清培养基稀释细胞,制成细胞悬液。分别按1:3和1:6的比例稀释C品牌、批次a和批次b三种基质胶,并最终调整细胞密度至1×107个/mL。
  C.皮下接种细胞
  1.选取6-8周C57BL/6的雌性小鼠18只,每组3只。
  2.分别在小鼠后背左右两侧腋下接种1×106个细胞。
  3.在SPF级屏障环境的条件下饲养14天。
  D.结果统计
  14天后取出肿瘤,称取重量。
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