人结直肠

产品信息

其他自备材料和试剂

ABW &模基生物基质胶

上皮类器官基础培养基  

类器官消化液  

润洗液

类器官冷冻保存培养基(无血清)  

DPBS (1X)，液体，不含钙和镁  

胎牛血清(FBS)  

EDTA

人结直肠类器官扩增培养基和稳态培养基的制备

采用无菌技术制备人结肠类器官扩增培养基和稳态培养基。在人结肠类器官扩增培养基中生长的类结肠器官绝大多数由LGR5干细胞，循环转运扩增(TA)细胞，早期肠细胞和少量杯状细胞组成。在人结肠类器官稳态培养基中生长的类结肠器官含有LGR5干细胞、TA细胞、早期和成熟肠细胞、杯状细胞、M细胞和肠内分泌细胞，以及少量簇状细胞。

以下是准备 10mL complete medium培养基的示例，如所需量不同，可相应调整用量。

1.冰上解冻人结直肠类器官培养因子B、人结直肠类器官培养因子C、人结直肠类器官培养因子D。

注意： 解冻后，建议将人结直肠类器官培养因子B、人结直肠类器官培养因子C、人结直肠类器官培养因子D分别分装后保存取用，避免反复冻融。

2. 配制人结肠类器官扩增培养基，专门用于原代培养和复苏。添加200 μL人结直肠类器官培养因子B (50x)、40 μL人结直肠类器官培养因子C (250x)、40 μL人结直肠类器官培养因子D (250x)、至9.72 mL人结肠类器官基础培养基中，混合均匀。

3.配制人结肠类器官扩增培养基，专门用于培养传代。添加200 μL人结直肠类器官培养因子B (50x)、40 μL人结直肠类器官培养因子C (250x)至9.76 mL人结肠类器官基础培养基中，混合均匀。

注意：配制后的人结肠类器官扩增培养基和稳态培养基可在 2-8°C 储存，建议在两周内使用。人结肠类器官培养因子B(50x)内含有细菌及真菌抗生素(50x)。